7 factores impotantes para el aislamiento de Cannabinoides

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Cómo optimizar uno de los pasos más esenciales del flujo de trabajo del procesamiento de cannabis, la purificación de cannabinoides por cromatografía.

7 factores impotantes para el aislamiento de Cannabinoides

Considere el procesamiento de cannabis. Necesita cultivar, cosechar, extraer, concentrar, purificar, controlar la calidad y si alguno de estos pasos falla o se realiza de manera subóptima, el resto del procesamiento posterior se verá inevitablemente afectado negativamente.
Algunos consejos sobre cómo optimizar la parte de purificación de cannabinoides del flujo de trabajo.

1. Desarrollo de métodos: establezca su método de cromatografía a pequeña escala primero y solo a mayor escala una vez que haya optimizado todos los parámetros. Eche un vistazo al cuadro a continuación para ver las fases estacionarias típicas, las fases móviles, las tasas de flujo y los gradientes utilizados para la separación de cannabinoides.

Eluyente A (disolvente débil)

Agua

Eluyente B (disolvente fuerte)

Etanol

Cartucho flash

12 g FlashPure EcoRex C18

Tasa de flujo

30 ml / min

 

 

 

t (min)

Tipo de degradado

%SEGUNDO

0 - 6,4

Lineal

70 - 90

6.4

Paso

100

6,4 - 16

Sostener

100


Un ciclo de cromatografía típico para purificar cannabinoides tiene los siguientes valores:

 
Volumen de columna general (CV)
Equilibrio
3-6
Volumen de inyección
máx. 0,1
Separación
3-6
Enjuague (solvente fuerte)
2-3


Después, idealmente, su cromatograma de cómo se separan el CBD, el THC y el THCA debería verse como el siguiente:



Para mejorar, use los mismos solventes, fase estacionaria, gradiente y velocidad lineal.

2. Presión: el tamaño y el radio de las partículas son los factores que tienen una influencia más sustancial en la presión. Tenga en cuenta que cada cartucho tiene un límite de presión máxima que no debe exceder. Si utiliza contrapresiones más altas, debe reducir el caudal, debido a los tiempos de funcionamiento más largos.

3. Carga de la muestra: intente mantener el volumen de la muestra lo más bajo posible. No recomendaría exceder los volúmenes de columna de 0.1. Tenga en cuenta que las muestras viscosas y los filtros obstruidos pueden disminuir el flujo de inyección. Asegúrese de limpiar o cambiar sus filtros de solvente con regularidad.

4. Utilice ELSD como método de detección: la mayoría de los sistemas de cromatografía están equipados con detectores UV . Pero considere las ventajas que ELSD puede aportar a la separación efectiva de los cannabinoides. ELSD puede detectar una amplia gama de entidades, incluidos compuestos no cromóforos, que son imposibles de analizar solo con detectores UV. Es importante destacar que esto incluye los terpenos del cannabis.

5. Selección de la fase estacionaria: el C-18 es la fase estacionaria más utilizada para separar extractos de cannabis con un sistema de cromatografía . Se encuentran disponibles diferentes tamaños de partículas de esta fase estacionaria. Cuando utiliza tamaños de partículas más pequeños, puede lograr una mayor capacidad de carga y una mayor resolución. Sin embargo, con tamaños de partículas más pequeños, también genera una contrapresión más alta, por lo que se verá obligado a reducir el caudal y aumentar el tiempo de ejecución.

6. Capacidad de carga: la capacidad de carga depende del tipo de fase estacionaria y del tamaño del cartucho . Por ejemplo, un C18 de 50 µm se puede cargar con cannabinoides de la siguiente manera:

Tamaño del cartucho
Capacidad de carga máxima
1,5 kg
1,5 - 37,5 g
3 kilogramos
3 - 75 g
5 kilogramos
5 - 125 g


7. Recolección de fracciones: este es un factor importante a considerar si sufre de una resolución más baja durante la separación de cannabinoides. Si enfoca la colección en el punto sin superponerse, aún puede lograr una alta pureza. Puede purificar aún más las fracciones contaminadas mediante reinyección o recristalización.

Obtenga más información sobre aplicaciones en Cannabis en el folleto completo de aplicaciones de Büchi. Descárgelo de manera gratuita en el link desplegable debajo

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Cómo optimizar uno de los pasos más esenciales del flujo de trabajo del procesamiento de cannabis, la purificación de cannabinoides por cromatografía.

Considere el procesamiento de cannabis. Necesita cultivar, cosechar, extraer, concentrar, purificar, controlar la calidad y si alguno de estos pasos falla o se realiza de manera subóptima, el resto del procesamiento posterior se verá inevitablemente afectado negativamente.
Algunos consejos sobre cómo optimizar la parte de purificación de cannabinoides del flujo de trabajo.

1. Desarrollo de métodos: establezca su método de cromatografía a pequeña escala primero y solo a mayor escala una vez que haya optimizado todos los parámetros. Eche un vistazo al cuadro a continuación para ver las fases estacionarias típicas, las fases móviles, las tasas de flujo y los gradientes utilizados para la separación de cannabinoides.

Eluyente A (disolvente débil)

Agua

Eluyente B (disolvente fuerte)

Etanol

Cartucho flash

12 g FlashPure EcoRex C18

Tasa de flujo

30 ml / min

 

 

 

t (min)

Tipo de degradado

%SEGUNDO

0 - 6,4

Lineal

70 - 90

6.4

Paso

100

6,4 - 16

Sostener

100


Un ciclo de cromatografía típico para purificar cannabinoides tiene los siguientes valores:

 
Volumen de columna general (CV)
Equilibrio
3-6
Volumen de inyección
máx. 0,1
Separación
3-6
Enjuague (solvente fuerte)
2-3


Después, idealmente, su cromatograma de cómo se separan el CBD, el THC y el THCA debería verse como el siguiente:



Para mejorar, use los mismos solventes, fase estacionaria, gradiente y velocidad lineal.

2. Presión: el tamaño y el radio de las partículas son los factores que tienen una influencia más sustancial en la presión. Tenga en cuenta que cada cartucho tiene un límite de presión máxima que no debe exceder. Si utiliza contrapresiones más altas, debe reducir el caudal, debido a los tiempos de funcionamiento más largos.

3. Carga de la muestra: intente mantener el volumen de la muestra lo más bajo posible. No recomendaría exceder los volúmenes de columna de 0.1. Tenga en cuenta que las muestras viscosas y los filtros obstruidos pueden disminuir el flujo de inyección. Asegúrese de limpiar o cambiar sus filtros de solvente con regularidad.

4. Utilice ELSD como método de detección: la mayoría de los sistemas de cromatografía están equipados con detectores UV . Pero considere las ventajas que ELSD puede aportar a la separación efectiva de los cannabinoides. ELSD puede detectar una amplia gama de entidades, incluidos compuestos no cromóforos, que son imposibles de analizar solo con detectores UV. Es importante destacar que esto incluye los terpenos del cannabis.

5. Selección de la fase estacionaria: el C-18 es la fase estacionaria más utilizada para separar extractos de cannabis con un sistema de cromatografía . Se encuentran disponibles diferentes tamaños de partículas de esta fase estacionaria. Cuando utiliza tamaños de partículas más pequeños, puede lograr una mayor capacidad de carga y una mayor resolución. Sin embargo, con tamaños de partículas más pequeños, también genera una contrapresión más alta, por lo que se verá obligado a reducir el caudal y aumentar el tiempo de ejecución.

6. Capacidad de carga: la capacidad de carga depende del tipo de fase estacionaria y del tamaño del cartucho . Por ejemplo, un C18 de 50 µm se puede cargar con cannabinoides de la siguiente manera:

Tamaño del cartucho
Capacidad de carga máxima
1,5 kg
1,5 - 37,5 g
3 kilogramos
3 - 75 g
5 kilogramos
5 - 125 g


7. Recolección de fracciones: este es un factor importante a considerar si sufre de una resolución más baja durante la separación de cannabinoides. Si enfoca la colección en el punto sin superponerse, aún puede lograr una alta pureza. Puede purificar aún más las fracciones contaminadas mediante reinyección o recristalización.

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